胎牛血清的常规储存温度为-20℃，若需长期保存，则应置于-80℃环境。解冻过程中，避免直接将血清置于常温（25-37℃）中，因这一做法容易引起絮状沉淀，可能会影响血清的质量。推荐的操作流程是：先将血清从-20/-80℃转移至4℃解冻，待完全液化后，再从4℃转移至室温。同时，在解冻过程中应定期晃动，以促进血清内各成分及温度的均匀混合，从而减小沉淀物的生成。

解冻后的胎牛血清可分装于15mL或50mL的无菌离心管中进行冷冻保存。根据血清使用的频率，可以选择将一管已解冻的血清存放于4℃以便于频繁配制培养基。但需注意，不宜过久存放，建议在一个月内用完。已解冻的胎牛血清不应在37℃或室温下存放过久，以防止血清中重要细胞生长因子的失活，从而影响细胞状态。

血清的添加量应控制在适当范围内，通常为5%、10%或20%。大多数细胞的正常培养通常使用10%的血清浓度，而某些原代细胞在提取时可能需要20%的血清。具体某一细胞株所适宜的血清浓度需根据细胞特性及实验目的自行摸索。

热灭活处理一般是在56℃下加热30分钟，以去活化血清中的补体。补体参与的反应包括溶细胞活性、平滑肌收缩等。尽管在某些特殊实验中需要进行热灭活，但对于大多数细胞培养而言，这并非必要步骤。处理过的血清对细胞生长的影响可能微乎其微，甚至由于高温处理而可能影响血清质量，从而导致细胞生长速率的下降和沉淀物增多等问题。

在细胞培养中，偶尔需要更换血清。如果直接将另一种血清配制的培养基应用于正在培养的细胞，可能会导致细胞生长缓慢甚至陡然脱落。这是因为细胞已对原有培养环境进行了适应，突如其来的更换即使是使用质量更好的血清，也可能造成不适应。因此，更换血清时，建议采用梯度替换法以帮助细胞适应。

在开始更换血清时，若是重新复苏的细胞，建议先使用原培体系进行复苏，待细胞状态回复后再进行测试。在测试过程中，不宜直接用100%新血清替代，应按比例渐进更换，例如首次更换以新旧血清1:3的比例，第二次改为1:1，第三次3:1，最后完全替换。对于一些对培养条件敏感的细胞，需要进一步细化替换比例。

假如在解冻后发现血清中有少量乳白色的絮状物或点状物，这主要是由于血清中的脂蛋白变性和解冻后形成的纤维蛋白造成。此类絮状物不会影响血清的质量，可以通过离心（400×g，5分钟）后取上清进行使用。一般来说，厂家提供的血清为无菌产品，无需额外过滤除菌。如发现有悬浮物，可以将血清加入培养液内进行过滤，但切勿直接过滤血清。

如果在细胞培养过程中观察到黑点生成，首先需检查培养基是否混浊，黑点是否不规则移动。如果细胞遭到污染，微生物将大规模繁殖，导致培养基迅速变黄或混浊。污染可能来源于细菌或支原体。如果在显微镜下观察细胞状态良好且与黑点出现前无变化，那么黑点出现可能与以下因素有关：(1)细胞生长过程中自然破碎后的细胞残骸；(2)血清中的杂蛋白，可能由于反复冻融的结果；(3)培养基用水或容器不合规。可通过离心和过滤的方法去除这些黑点；(4)原代细胞中出现的小黑点可能是来自原代组织中的杂质，通过多次传代可以清除。

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